1. 奥林巴斯物镜的数值孔径(NA)范围
数值孔径(Numerical Aperture, NA)是物镜的关键参数之一,决定了物镜的集光能力和分辨率。奥林巴斯作为光学显微镜领域的领先品牌,其物镜的NA范围广泛,以适应不同的观察需求:
低NA物镜(NA 0.04–0.2):常见于低倍物镜(如4×、10×),适用于大视野观察,但分辨率较低。
中NA物镜(NA 0.3–0.8):主要用于常规高倍物镜(如20×、40×),适用于明场、相差和普通荧光成像。
高NA物镜(NA 0.9–1.4):多为油浸或水浸物镜(如60×、100×),适用于高分辨率荧光、共聚焦和超分辨显微技术。
超高NA物镜(NA >1.4):特殊设计的浸油物镜,用于超分辨率显微镜,可突破光学衍射极限。
奥林巴斯的高端物镜(如UPLSAPO系列)通常具有较高的NA值,例如100×油镜的NA可达1.4以上,而专用于活细胞成像的水浸物镜则提供高NA和长工作距离的平衡。
2. NA对显微成像的影响
(1)分辨率
NA直接影响显微镜的分辨率,其与分辨率(d)的关系由阿贝公式决定:
d=NA0.61λ
其中,λ为光的波长。NA越高,可分辨的样品细节越精细。例如,NA=1.4的物镜比NA=0.8的物镜能分辨更小的结构。
(2)光收集能力
NA越高,物镜捕获的光越多,成像亮度越高。这对于弱光成像至关重要,高NA物镜可显著提高信噪比,减少曝光时间。
(3)景深
NA越高,景深越浅,这意味着焦平面外的样品区域会更快模糊。这在三维成像中需要权衡,通常需结合Z轴扫描获取清晰图像。
(4)像差校正
高NA物镜通常需要更复杂的光学设计(如APO复消色差校正),以减少球差和色差。浸油物镜(NA>1.0)还需确保浸液折射率匹配,否则会导致像质下降。
3. 如何选择合适的NA?
常规观察(如病理切片):NA 0.4–0.8的中倍物镜即可满足需求。
高分辨率荧光成像:选择NA≥1.2的油镜或水镜,如奥林巴斯UPLSAPO 100×/1.40 Oil。
活细胞成像:需平衡NA和工作距离,如水浸物镜(如60×/1.2 W)。
结论
数值孔径(NA)是衡量物镜性能的核心指标,奥林巴斯提供从低NA到超高NA的多样化物镜,以满足不同显微技术的需求。高NA可提升分辨率和亮度,但也带来景深变浅和成本增加的问题,用户需根据实验目标合理选择。
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